程序降溫儀分類和使用步驟介紹

 　　程序控制冷凍裝置俗稱：程序降溫儀，也稱為程序冷凍儀、胚胎冷凍儀、細胞冷凍儀、程控降溫儀；廣泛用于凍存細胞、胚胎等。采用微機控制技術，軟件，能較準確地控制液氮的施放量，從而保證被凍存的生物制品以適宜的冷凍速率降溫冷凍。該儀器具有操作簡便、人機界面清楚。

　　程序降溫儀是實現生物材料深低溫保存的關鍵設備，根據降溫及控制原理不同，可以將其分為兩類：①液氮噴射式降溫儀。②升降式降溫儀。它們均以液氮為制冷源。程序降溫儀主要由冷卻室、低溫電磁閥、風扇、溫度傳感器、放大電路、微處理機和液氮容器組成。

　　液氮噴射式降溫儀適合較大容積樣本的降溫保存，優點在于控溫好，受外界環境干擾小，但是其價格昂貴，液氮消耗量大，液氮中如有少量水分就會造成輸送管道堵塞和低溫電磁閥失靈。

　　升降式降溫儀由液氮容器、步進機、微機控制系統和記錄儀組成。它是利用液氮的自然蒸發在杜瓦瓶頸部所形成的溫場（0~-196℃），由步進機根據預先設定的降溫、復溫程序控制生物標本在此溫度區內上下移動的速率，來控制標本的溫度和降溫速率。

　　程序降溫儀步驟：

　　(1)冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基，使細胞處于指數生長期。

　　(2)配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養基、血清，逐滴加入二甲基亞砜(DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

　　(3)離心收集培養之細胞，用加血清的培養基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0.1ml)計數細胞濃度及凍前存活率。

　　(4)取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ml，混合均勻，分裝于已標示*之冷凍保存管中，1～2ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。