在微生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、環(huán)境工程及生物能源等研究領(lǐng)域，有一類對(duì)氧氣高度敏感甚至致死的微生物——厭氧菌（Anaerobes），如產(chǎn)甲烷菌、梭狀芽孢桿菌、擬桿菌等。它們在人體腸道微生態(tài)、污水處理、沼氣發(fā)酵及某些感染性疾病（如氣性壞疽、牙周炎）中扮演關(guān)鍵角色。然而，由于氧氣會(huì)不可逆地破壞其關(guān)鍵酶系統(tǒng)（如氫化酶、固氮酶），常規(guī)有氧環(huán)境無法支持其生長。為此，科學(xué)家開發(fā)出一種高度專業(yè)化的設(shè)備——厭氧培養(yǎng)箱（Anaerobic Chamber或Anaerobic Workstation），它不僅能提供穩(wěn)定的無氧環(huán)境，還集成了操作、培養(yǎng)與觀察功能，成為研究厭氧微生物核心工具。

一、基本結(jié)構(gòu)與工作原理

厭氧培養(yǎng)箱本質(zhì)上是一個(gè)密閉、正壓、惰性氣體保護(hù)的操作與培養(yǎng)一體化系統(tǒng)。其核心組成部分包括：

1.主操作艙（Main Chamber）

通常由透明丙烯酸或不銹鋼制成，內(nèi)部維持嚴(yán)格無氧環(huán)境（O?濃度<0.1%，常控制在1–5 ppm）。艙內(nèi)配備手套端口，研究人員通過密封手套進(jìn)行無菌操作，避免樣品暴露于空氣。

2.氣體循環(huán)與凈化系統(tǒng)

箱內(nèi)持續(xù)通入混合氣體（常見為80%N?+10%H?+10%CO?），其中：N?作為平衡氣；H?在鈀催化劑作用下與殘余O?反應(yīng)生成水（2H?+O?→2H?O），實(shí)現(xiàn)深度除氧；CO?維持培養(yǎng)基pH穩(wěn)定，促進(jìn)部分厭氧菌生長。氣體經(jīng)高效循環(huán)泵驅(qū)動(dòng)，通過催化除氧器和干燥劑反復(fù)凈化，確保環(huán)境長期穩(wěn)定。

3.過渡艙（Airlock）

用于物品進(jìn)出主艙而不破壞整體厭氧環(huán)境。小型過渡艙可快速抽真空-充惰氣循環(huán)3–5次，大型通道式過渡艙則支持培養(yǎng)皿架、儀器等大件轉(zhuǎn)移。

4.溫控與培養(yǎng)系統(tǒng)

內(nèi)置加熱板或恒溫平臺(tái)，溫度范圍通常為室溫至45℃（部分可達(dá)60℃），滿足不同厭氧菌的最適生長需求。部分型號(hào)集成濕度控制、振蕩培養(yǎng)或顯微觀察窗口。

二、技術(shù)優(yōu)勢與應(yīng)用場景

1.真正實(shí)現(xiàn)全程無氧操作

從接種、傳代、挑單菌落到生化鑒定，所有步驟均在無氧環(huán)境下完成，極大提高嚴(yán)格厭氧菌（如產(chǎn)甲烷古菌）的分離成功率。

2.高通量與長期培養(yǎng)能力

可同時(shí)容納數(shù)百個(gè)培養(yǎng)皿或試管，支持連續(xù)數(shù)周甚至數(shù)月的靜態(tài)或動(dòng)態(tài)培養(yǎng)，適用于慢生長菌種（如某些瘤胃微生物）的研究。

3.保障實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性與生物安全

環(huán)境參數(shù)（O?、H?、CO?、溫度）實(shí)時(shí)監(jiān)控并自動(dòng)調(diào)節(jié)，減少人為誤差；密閉設(shè)計(jì)也有效防止病原性厭氧菌（如艱難梭菌）外泄，符合BSL-2及以上生物安全要求。

典型應(yīng)用包括：

臨床微生物學(xué)：分離鑒定傷口、腹腔、婦科等部位的厭氧感染病原體；

腸道微生物組研究：培養(yǎng)“不可培養(yǎng)”（unculturable）的人源厭氧共生菌；

環(huán)境與能源微生物：富集產(chǎn)甲烷菌、硫酸鹽還原菌用于沼氣工程或生物修復(fù)；

食品與發(fā)酵工業(yè)：篩選乳酸菌、丙酸菌等用于益生菌或奶酪生產(chǎn)；

基礎(chǔ)科研：研究厭氧代謝途徑、共生機(jī)制及新型抗生素靶點(diǎn)。

三、使用注意事項(xiàng)與維護(hù)要點(diǎn)

催化劑定期活化：鈀催化劑使用數(shù)月后活性下降，需在300℃氫氣氛圍中再生；

嚴(yán)格控制水分與有機(jī)溶劑：高濕或揮發(fā)性溶劑可能毒化催化劑或腐蝕箱體；

定期校準(zhǔn)氣體傳感器：O?和H?傳感器需按廠家建議周期標(biāo)定；

規(guī)范操作流程：進(jìn)出物品需充分除氧，避免頻繁開關(guān)過渡艙；

清潔與消毒：使用無氧兼容的消毒劑（如過氧乙酸）定期擦拭內(nèi)壁，防止生物膜形成。

厭氧培養(yǎng)箱不僅是實(shí)驗(yàn)室的一臺(tái)設(shè)備，更是打開“無氧生命世界”大門的鑰匙。它讓人類得以在受控條件下觀察、操控那些在地球早期生命演化中占據(jù)主導(dǎo)地位的微生物，從而深化對(duì)生命多樣性的理解，并推動(dòng)醫(yī)學(xué)、能源與環(huán)境領(lǐng)域的創(chuàng)新突破。

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